掌握移液器移液過程中每個步驟的節(jié)奏
移液器的工作量大,長期使用,將會使彈簧彈力發(fā)生變形,移液器加之本身是塑料,不耐磨擦,就會產(chǎn)生誤差。為了保證移液器傳遞液體量的準(zhǔn)確性,必須對移液器進行定期校準(zhǔn)。為了更好地發(fā)揮該類計量儀器的作用,對新購進的儀器要進行校準(zhǔn)才能使用;對正在使用的計量儀器,由于長期使用會造成其示值于度量對象的誤差,這種誤差若不進行控制,及時校正,必定會影響科研工作。因此,對使用的移液器要定期檢定、校正,并建立檔案,只有這樣才能使其在日常工作中更好的發(fā)揮作用。
移液器一些非常常見的的移液方法與錯誤,以及避免方法。
吸頭浸入深度不正確
正確的入液深度可使準(zhǔn)確度提高達(dá)5%。移液器的吸頭入液深度應(yīng)當(dāng)為1-2mm,大量程移液器的吸頭入液深度zui 高為3-6mm,具體取決于吸頭大小。如果吸頭入液太深,那么吸頭中的氣壓會增大,導(dǎo)致吸入過多的液體。
移液器角度錯誤
移液器吸頭在樣品中的入液角度應(yīng)當(dāng)盡量接近垂直,與垂直方向偏離不超過20度。角度太大可能導(dǎo)致吸頭中吸入太多的液體,造成吸液不準(zhǔn)確。例如,在與垂直方向呈30度角時,可過多吸入達(dá)0.7%的液體。
不一致的分液
通過確保zui后剩余的液滴*分液而非吸附到吸頭前端,從而獲得zui高的準(zhǔn)確性和樣品之間的可再現(xiàn)性。對于絕大多數(shù)應(yīng)用,建議用吸頭前端沿著容器壁進行分液,因為這可減少或消除殘留在吸頭里的樣品量。該技巧可提高1%或更高的準(zhǔn)確性。
無法預(yù)先潤洗
用移液器分液時,會在吸頭內(nèi)壁覆有一層液膜,結(jié)果使排出的液體量稍微少于所要求的量。用將要使用的液體預(yù)先潤洗新吸頭至少兩次,平衡好吸頭內(nèi)壁。
移液節(jié)奏不一致
確保樣品之間的移液節(jié)奏一致。避免匆忙或快速的操作,要掌握移液過程中每個步驟的節(jié)奏。